Effect of Pyoverdin II on lipid peroxidation in milk by high performance liquid chromatography(ผลของไพโอเวอร์ดีน II ต่อการเกิดลิพิดเพอร์ออกซิเดชันในนมด้วยเทคนิคโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง)
Keywords:
Pyoverdin II(ไพโอเวอร์II), Lipid peroxidation(ลิพิดเพอร์ออกซิเดชัน), Malondialdehyde(มาลอนไดอัลดิไฮด์)Abstract
Lipid peroxidation with iron-catalyzed deteriorates milk, resulting in malondialdehyde (MDA). The detection of MDA was done by derivatization with 2-thiobarbituric acid (TBA) prior to analysis by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection, λex at 532 nm and λem at 552 nm. Mobile phase was a mixture of 10 mM phosphate buffer (pH 7.0) and methanol at ratio of 60:40 (v/v) with flow rate of 0.8 mLmin-1. A linearity relationship (r2) between peak height and MDA concentration range of 0.5-5.0 µM was 0.9950. This method was applied to detect MDA in different types of milk samples and studied to determine quality of milk. The effect of pyoverdin II obtained from Pseudomonas aeruginosa TISTR 1467, which is high affinity for iron (III), on lipid peroxidation in milk was studied. The results showed that pyoverdin II has effect on lipid peroxidation in milk samples
กระบวนการเกิดลิพิดเพอร์ออกซิเดชันเป็นสาเหตุหนึ่งของการเสื่อมคุณภาพของนมโดยมีเหล็กเป็นตัวเร่งปฏิกิริยา และได้สารมาลอนไดอัลดิไฮด์เกิดขึ้นจากปฏิกิริยา ซึ่งสามารถตรวจวัดมาลอนไดอัลดิไฮด์ได้ โดยทำอนุพันธ์กับกรดไทโอบาร์บิทูริค ก่อนนำมาวิเคราะห์ด้วยเทคนิคโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงที่ตรวจวัดโดยใช้เครื่องฟลูออเรสเซนต์ ด้วยความยาวคลื่นแสงกระตุ้นที่532 นาโนเมตรและคายแสงที่ 552 นาโนเมตร โดยใช้สารผสมระหว่าง 10 มิลลิโมลาร์ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีเอช 7.0) กับเมทานอลในอัตราส่วน60 ต่อ 40โดยปริมาตร เป็นเฟสเคลื่อนที่ ด้วยอัตราการไหล 0.8 มิลลิลิตรต่อนาที จากการศึกษา พบว่าได้ความสัมพันธ์เชิงเส้นตรงระหว่างความเข้มข้นของมาลอนไดอัลดิไฮด์กับความสูงพีคอยู่ในช่วง 0.5-5.0 ไมโครโมลาร์ มีค่าเท่ากับ 0.9950 การวิเคราะห์โดยวิธีนี้สามารถหาปริมาณของมาลอนไดอัลดิไฮด์ในตัวอย่างนมชนิดต่าง ๆ เพื่อใช้ตรวจสอบคุณภาพของนม โดยศึกษาผลของไพโอเวอร์ดีน II ที่ได้จากแบคทีเรีย Pseudomonas aeruginosa TISTR1467 ซึ่งมีสมบัติในการจับเหล็ก(III) ได้ดี ต่อการเกิดลิพิดเพอร์ออกซิเดชันในนม และพบว่าไพโอเวอร์ดีน II มีผลต่อการเกิดลิพิดเพอร์ออกซิเดชันในตัวอย่างนม
