Analysis of Amino Acids and Biogenic Aminesby High Performance Liquid Chromatography(การวิเคราะห์กรดอะมิโน และไบโอเจนิกเอมีน โดยโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง)

Abstract

The simultaneous analysis of 10 amino acids (arginine, aspartic acid, asparagine, glutamic acid, histidine, leucine, lysine, phenylalanine, tryptophan and -aminobutyric acid) and 6 biogenic amines (cadaverine, putrescine, histamine, spermidine, tryptamine and tyramine) as their o-phthalaldehyde-ethanethiol (OPA-ET) derivatives prior to reversed phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) with fluorescence detection has been studied. Parameters affect the analysis such as derivatization conditions and optimum HPLC condition were investigated. Gradient elution with a mixture of methanol and water was used, and complete separation was achieved within 30 min. The proposed method is easy and was applied to determine amino acids and biogenic amines in beer samples. 

งานวิจัยนี้ได้ศึกษาการวิเคราะห์ปริมาณกรดอะมิโน 10 ชนิด(อาร์จินิน กรดแอสพาร์ติก แอสพาราจิน กรดกลูตามิก ฮิสทิดิน ลิวซีน ไลซีน ฟีนิลอะลาลานีน ทริปโทแฟน และกรดแกรมมามาอะมิโนบิวไทริก)และไบโอเจนิกเอมีน 6 ชนิด (คาดาเวอรีน พูเทรสวีน ฮิสทามึน สเปอร์มิดีน ทริปทามึน และไทรามึน)พร้อมกันโดยการเตรียมอนุพันธ์กับ ออร์โท-พาเทลอัลดีไฮด์-อีเทนไทออล ก่อนการแยกด้วยโครมาโทรกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงแบบรีเวิร์สเฟส และตรวจวัดแบบฟลูออเรสเซนต์ ได้ศึกษาปัจจัยที่มีอิทธิพลต่อผลการวิเคราะห์ เช่น สภาวะการเตรียมอนุพันธ์ และสภาวะที่เหมาะสมในการแยกด้วยเทคนิคโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง การวิเคราะห์สามารถเสร็จสิ้นภายใน 30 นาที โดยการชะแบบเกรเดียนท์ด้วยเมทานอลและน้ำ วิธีการวิเคราะห์นี้ง่าย และได้นำไปประยุกต์ใช้ในการวิเคราะห์ปริมาณกรดอะมิโน และไบโอเจนิกเอมีนในตัวอย่างเบียร์