Cloning and Characterization of Protease Inhibitor from Latex of Rubber Tree (Hevea brasiliensis)(การโคลนและศึกษาสมบัติของยีน Protease Inhibitor จากน้ำยางพารา (Hevea brasiliensis))

Abstract

cDNA library of Hevea brasiliensis was performed and found full-length of protease inhibitor (Hb-PI) cDNA. An open reading frame encoding 210 bp of Hb-PI gene was cloned to express in E. coli via pQE-40 expression vector. The trypsin inhibition by the recombinant protein was tested and the result showed that 0.25 mg protein from recombinant Hb-PI had the ability to inhibit 0.2 mg/ml trypsin for 9.5% and the percentage of inhibition was increased to 36, when Hb-PI protein concentration was increased up to 0.75 mg protein.

การศึกษาcDNA library ของน้ำยางพารา ได้พบยีนเส้นเต็มของตัวยับยั้งเอนไซม์โปรตีเอส (Hb-PI) ซึ่งมาขนาด210 เบส เมื่อนำมาแสดงออกในแบคทีเรีย E. coli โดยโคลนเข้ากับเวคเตอร์ pQE-40 และกระตุ้นการสังเคราะห์โปรตีนลูกผสม Hb-PI ผลจากการศึกษาการยับยั้งเอนไซม์ทริปซิน พบว่าโปรตีนลูกผสมดังกล่าวปริมาณ 0.25 มก. สามารถยับยั้งเอนไซม์ทริปปริมาณ .2 มก./มล ได้ 9.5%ค่าเปอร์เซ็นต์ การยับยั้งมีค่าเพิ่มเป็น 36 เมื่อปริมาณโปรตีนลูกผสมHb-PI เพิ่มขึ้นเป็น .75มก.