การศึกษาเบื้องต้นเกี่ยวกับการตรวจหาดีเอ็นเอจากการสัมผัสและเยื่อบุกระพุ้งแก้มบนก้านเก็บตัวอย่างหัวคอตตอน โดยใช้สีย้อม SYBR®Green I Nucleic Acid Gel Stain

บทคัดย่อ

ตัวอย่างดีเอ็นเอจากการสัมผัสและเยื่อบุกระพุ้งแก้มเป็นตัวอย่างที่ไม่สามารถมองเห็นได้ด้วยตาเปล่า และถือเป็นหนึ่งในตัวอย่างที่นิยมส่งเข้ามาตรวจพิสูจน์ลายพิมพ์ดีเอ็นเอในห้องปฏิบัติการ ซึ่งตัวอย่างเหล่านั้นไม่อาจทราบได้ว่ามีหรือไม่มีดีเอ็นเออยู่จนกว่าจะเข้าสู่กระบวนการตรวจพิสูจน์ โดยงานวิจัยครั้งนี้จึงได้ศึกษาการตรวจหาดีเอ็นเอจากการสัมผัสและเยื่อบุกระพุ้งแก้มบนก้านเก็บตัวอย่างหัวคอตตอนซึ่งเป็นก้านเก็บตัวอย่างที่ถูกใช้งานด้านนิติวิทยาศาสตร์ในปัจจุบัน โดยใช้สีย้อม SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain เพื่อใช้เป็นวิธีการคัดกรองตัวอย่างดีเอ็นเอจากการสัมผัสเบื้องต้น สำหรับลดปริมาณตัวอย่าง ลดการสูญเสียทรัพยากรที่ใช้ในการตรวจพิสูจน์หลักฐานของประเทศไทย โดยเก็บตัวอย่างดีเอ็นเอจากการสัมผัสจากอาสาสมัครชายและหญิง และเยื่อบุกระพุ้งแก้มจากอาสาสมัครหญิง ทำการย้อมสีลงบนหัวของก้านเก็บตัวอย่างด้วยสีย้อมที่มีความเข้มข้น 5X นำไปสังเกตการเรืองแสงภายใต้เครื่อง Gel Documentation System (Major Science, USA) และกล้องฟลูออเรสเซนต์ จากนั้นวัดค่าการเรืองแสงด้วยโปรแกรม Image J เพื่อดูความแตกต่างของการเรืองแสงระหว่างก้านเก็บตัวอย่างที่มีดีเอ็นเอกับก้านเก็บตัวอย่างที่ไม่มีดีเอ็นเอ จากการทดลองพบว่า ก้านเก็บตัวอย่างหัวคอตตอนไม่เหมาะในการใช้ตรวจจับดีเอ็นเอจากการสัมผัส แต่สามารถใช้ได้กับการตรวจจับดีเอ็นเอจากกระพุ้งแก้มที่จะสามารถให้ผลการตรวจจับที่ชัดเจน วัดได้จากการเรืองแสงที่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญหากเทียบระหว่างก้านเก็บตัวอย่างกระพุ้งแก้มที่ผ่านการย้อมสีกับก้านเก็บตัวอย่างเปล่าที่ผ่านการย้อมสี ที่ช่วงค่าความเชื่อมั่น 95% เมื่อทดสอบด้วย Paired Samples T-Test